硫酸软骨素比浊法(比浊法测定硫酸软骨素含量的简单方法)

硫酸软骨素比浊法

硫酸软骨素是一种由软骨组织中提取而来的天然高分子化合物，具有增强细胞活性、促进软骨细胞增殖及抑制软骨细胞凋亡等功效，因而被广泛应用于医学、保健品、化妆品等领域。为了保证硫酸软骨素产品的质量，需要进行含量测定。

测定原理及步骤

硫酸软骨素的含量测定可采用比浊法。具体操作步骤如下：

1. 取少量硫酸软骨素样品，加入适量无菌水或生理盐水使其溶解。

2. 分别取适量硫酸软骨素标准品和未知含量的样品，加入1mol/L的三氯醋酸（TCA）使其蛋白质沉淀。

3. 离心沉淀后，将上清液取出加入两倍体积的酒精或醚沉淀沉淀蛋白质，再次离心，并用去除沉淀后的上清液。

4. 取1ml沉淀后的上清液加入10ml甲醇，再加入3ml蒽醌溶液，充分混匀后，以1ml/min的速度添加5ml浓盐酸，反应10min。

5. 在反应开始2min后，取一个干净的小试管，加入10ml蒸馏水，这样可以避免比漂移动时由于抖动而形成气泡。

6. 在加盐酸进样管（分别装有反应前和反应后的混合液）的上端，设置高于试管上缘的一点，缓缓将反应混合液注入干净小试管中，让其自由地下降，避免振荡，形成比漂体。记下反应后的反应混合液的透光度值，即可得到硫酸软骨素的含量。

注意事项

1. 测定时需注意反应管、试管、注射器、滴管等均需严格清洗干净；

2. 反应时需要严格控制加酸的速度，过快或过慢均会影响结果；

3. 硫酸软骨素样品的溶解度较低，需使用适量的无菌水或生理盐水进行稀释；

4. 测定前应根据样品特性选择合适的标准品；

5. 稀释标准品及样品时需注意避免二次稀释，否则会影响测定结果。

总结

通过硫酸软骨素比浊法，可精确地测定硫酸软骨素的含量。在操作过程中需要严格控制每一个步骤，以保证测定结果的准确性和可靠性。